1、填料的种类：

　　填料的基质一般选择使用多孔硅胶或聚合物等，在细孔的表面有多种经过化学修饰的官能团。

　　利用目标成分疏水性的不同起到分离效果的反相分离模式，利用极性不同进行分离的正相分离模式，根据分子大小的不同而分离的尺寸排阻模式，根据离子性质的不同而达到分离的离子交换模式，又或者分离光学异构体等，根据目的的不同，需要选择对应的填料。

　　作为填充剂的代表十八烷基、辛基、丁基等即在硅胶的细孔表面化学键合的C18（ODS）、C8或C4等，碳链越长，疏水性越强。

 

　　2、填料孔径：

　　多孔硅胶为基体的填料表面具有无数的细孔，需要根据目的成分的分子量选择对应大小的填料孔径。微孔径100?（10nm）对应5000左右的分子量。分子量大于5000的，可以选择300?（30nm）或以上的大孔径柱子。目的成分能够进入孔的话，才能与官能团相互作用从而起到分离的效果。对于大分子蛋白质或聚合物等高分子，如果不是大孔径的基体，与官能团的相互作用就会减少。另外，分析低分子时，选择太大的微孔，由于会扩散故导致峰型可能会展宽。

 

　　3、Waters液相色谱柱尺寸（内径）：

　　一般通用的HPLC柱内径为4.6mm，LC/MS内径多为2.1mm，毛细管HPLC色谱柱为不满1mm，制备HPLC色谱柱6.0mm以上。通用HPLC系列，内径不同得到的结果也不同。即使改变内径，根据色谱柱的截面积比改变相应的流速，保留时间基本不会改变。特别是对于像UV、RI一样对于浓度要求很高的检测器而言，流速越小，其对应的灵敏度也越高。需要注意的是，通用型HPLC色谱柱内径太小，装置的死体积影响变大，峰型会变宽。并且根据HPLC系统使用目的的不同种类也不同，能够设定的正确的流速与流速范围，系统响应等也会不同，所以根据系统不同选择对应的内径是十分重要的。

 

　　4、Waters液相色谱柱尺寸（长度）：

　　一般使用较多的色谱柱的长度，通用型，制备HPLC柱长度为150～250mm，LC/MS为100-150mm，超快速HPLC（UHPLC）为50-100mm。Waters液相色谱柱长度越长理论塔板数也越高。只是，需要注意，色谱柱长度加倍后，分析时间与使用压力也会加倍。对于2μm或者3μm的微粒子，分离度和理论塔板数都较好时，将色谱柱的长度变短，可以缩短分析时间，进行快速分析。

 

　　5、接头形式：

　　Waters液相色谱柱的接头根据厂家的不同也会有不同。一般分析色谱柱是1/16英寸外径的管子使用螺丝进行连接，若连接不同的接口，较易产生死体积与漏液现象。

　　特别对于不锈钢的配管等，需用套圈固定管子，就必须选择对应的接口形式。

　　接口形式和螺距有英寸螺距和毫米螺距两种。一般Waters接口型使用比较普遍。无论是HPLC或UHPLC，通过选择适当的色谱柱接口形式，InertSustain以及Inertsil的性能能够充分的发挥。